大脑中动脉(MCA)为临床上发生脑缺血损伤zui常见的部位之一。故大脑中动脉阻塞(MCAO)模型被广泛用于局灶性脑缺血的研究。用血管内线栓阻断法制备大鼠 MCAO模型。已被脑血管病研究者广泛接受和采用。
是研究局灶性脑缺血zui常用的造模方法。该方法利用尼龙线栓从一侧颈总动脉或颈外动脉阻断MCA供血造成局灶性脑缺血,缺血一定时间后回撤线栓,缺血区可通过脑底动脉环由对侧的颈内动脉、椎基底动脉和脑动脉皮质支的侧支循环实现再灌注。
(二)MCAO模型制备的操作方法与步骤
1.线栓的制备 选用直径为0.26mm的钓鱼线,用锋利薄刀片将线身垂直截成5cm长的小段,用细砂纸打磨头端棱角,在体视镜下选出头端光滑钝圆、大小一致者。用记号笔在距线栓头端20mm处做一标记,将线栓浸泡消毒后晾干。术前置于无菌生理盐水中备用,线栓临用前浸蘸2.5×1000000U/L肝素钠。
2.术前动物准备 分笼饲养(室温20~23℃,湿度60%~70%),明暗光照12h:12h,适应性饲养1~2d,并按实验动物使用的3R原则给予人道关怀。术前12h禁食,自由饮水。
3.动物麻zui 以3.6%水合氯醛腹腔内注射麻zui(10ml/kg),注射qi针头从腹部向头方向刺入腹腔,回抽针芯阻力较大、无回血、无胃肠道内容物时,缓慢推注。约10min后大鼠逐渐瘫软,反应淡漠,用手牵拉鼠尾无明显反抗时置仰卧位,固定上颌中切牙和四肢。实验过程中维持大鼠肛温在37℃左右,直到恢复活动。4.手术步骤 手术按外ke无菌原则操作。
①备皮,碘伏消毒皮肤。
②于正中线旁开约5mm处,行颈部右侧纵行切口,剪开浅筋膜,暴露右侧胸锁乳突肌,在胸锁乳突肌与颈前肌群之间向深部钝性分离,暴露颈动脉鞘,玻璃分针游离颈总动脉(CCA)和迷走神经,直至 CCA分叉处。钝性分离向内行走的颈外动脉(ECA)及向外后行走的颈内动脉(ICA)。
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