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PCR实验室为什么要进行三区隔离?
PCR反应过程中不断进行升温降温,液体蒸发又冷凝,PCR管中部分空气形成气溶胶,携带大量的DNA扩增产物(注意,1ng扩增产物中可作为模板的DNA片段数量,超过1ng起始模板中可扩增DNA片段数量的几百万倍甚至更高。比如人的基因组DNA有30亿个bp,要扩增的单拷贝基因片段是300bp,1ng起始模板中可以作为模板DNA片段只占总起始模板DNA总量的千万分之一)。如果在实验室打开含PCR扩增产物的管盖,大量携带DNA扩增产物的气溶胶就会涌出,扩散到空气中,从而对环境造成污染。
虽然在整个空间环境中DNA的含量很低,但由于理论上只要有1个可做为模板的DNA片段也能PCR扩增成功,这就是为什么在污染环境中阴性对照也能扩增出条带的原因。所以在PCR实验室(比如临床PCR检验实验室),通常有四区隔离(或至少是三区隔离)的要求。
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PCR实验室又称为基因扩增实验室。PCR技术是实验结果的重要来源,根据这种分子生物学技术,可以扩增出特定的DNA片段,并利用基因含量来探索患者体内的病毒含量,精度可达到纳米级。该方法灵敏性强、特异性高、快捷、对样品要求低,已广泛应用于医院的临床诊断和防疫检测部门的疫病诊断。PCR实验室主要包括试剂准备区、样品处理区、核酸扩增区、产物分析区等四个区域。
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PCR实验室管理细则规范:
严格按照标准执行实验各项操作规程,及时做好清洁、消毒、整理及分析统计工作等工作。
PCR实验室内仪器由专人负责,未经许可不得擅自使用或挪用,要爱护仪器设备,并定期进行维护和保养。
爱护实验室财产,注意安全,离开实验室前应关好门窗,检查水电等。由于PCR实验室的特殊功能,在设计和建造初期就必须严格按照标准进行,以确保实验操作的安全性。
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